宁夏血液集中化检测冷凝集血液处理和屏蔽机制

【摘要】  目的  探讨献血者冷凝集血液处理流程和献血者屏蔽机制。方法  回顾性分析了2016年1月-2023年12月以来宁夏血液集中化检测冷凝集血液检测和处理情况，采用《全国临床检验操作规程》中冷凝集素试验操作规程进行确认检测，对结果进行统计分析。结果 冷凝集素阳性共12份，阳性率为0.02‰，与年龄、献血季节环境温度相关，冷凝集素效价≥1：32时进行血液报废和献血者屏蔽。结论  通过重视血液采集、制备、储存过程中对轻度冷凝集血液识别、发现、送检，加强献血者健康征询，建立冷凝集素血液处理流程和献血者屏蔽机

制，可有效避免血液浪费，保证输血安全。

【关键词】  冷凝集； 血液处理；屏蔽机制

随着医学科学的发展,人们对血液质量和血液安全提出了更高层次的要求。冷凝集素是一种大分子针对RBC膜抗原的免疫球蛋白M（IgM）型抗体,存在于血浆当中,这种冷抗体在31℃以下温度时能作用于自身的红细胞或O型红细胞而发生可逆性的红细胞凝集,在4℃时抗体活性最强,可与自身红细胞和他人红细胞发生凝集反应,其凝集具有可逆性，当温度升高后活性减弱，凝集消失[1]。在实际工作中，能引起输血反应的冷凝集素效价目前没有明确规定，高效价冷凝集素血液是否可以用于临床及献血者能否再次献血没有明确规定，而且冷凝集素也不是血站常规检测项目，高效价冷凝集素血液对于采供血工作和临床输血有一定的风险性。为此，我们回顾性分析了2016年1月-2023年12月以来宁夏血液集中化检测冷凝集血液检测和处理情况，参考《全国临床检验操作规程》[2]中冷凝集素试验操作规程进行确认检测，对结果进行统计分析，现报告如下。

1  材料与方法

1.1 标本   回顾性的分析2016年1月-2023年12月，宁夏集中化检测无偿献血者血液标本共计550796份，均为EDTA-K2抗凝血浆。

1.2 试剂   戴安娜全自动血型仪配套微柱凝胶卡，直接抗人球蛋白试剂、红细胞血型抗体筛选细胞、ABO血型反定型红细胞试剂均为上海血液生物有限公司生产，16种谱细胞为美国宜美康公司生产。

1.3 仪器设备  戴安娜全自动血型仪，日本久保田KA-2200血型血清学离心机，上海恒跃37℃

水浴箱，加样枪，振荡器。

1.4 冷凝集素（IgM性质）效价测定方法：取10支试管，标明稀释度，每管加入生理盐水150ul，取无偿献血者血浆150ul加入第一管，作倍比稀释。每管加入相应的3%～5%O型红细胞悬液50ul，充分混匀。分别置4℃、室温和37℃放置15～30分钟,采用1000g离心30秒，观察以1+报效价结果。

1.5 统计学方法  回顾性分析2016年到2023年我中心采集、制备、检测、发放过程中发现的冷凝集素引起的血液凝集，分析可能影响的因素，包括：性别、年龄、血型、献血季节、献血次数等；应用SPSS20.0统计软件，计数资料用c2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2   结果

2.1  2016～2024宁夏血液集中化检测冷凝集血液人群分布  2016年1月-2023年12月共采集无偿献血者标本550796份，以血液4℃储存出现冷凝集且效价≥1：4为阳性，冷凝集素阳性共12份，阳性率为0.02‰，人群分布情况见表1。

表1  2016～2024宁夏血液集中化检测冷凝集素阳性人群分布

2.2   冷凝集素实验及抗体效价检测情况见表2

                    表2  2016～2024宁夏血液集中化检测冷凝集素阳性抗体效价

3  讨论

回顾性分析2016年到2023年宁夏血地区在采集、制备、检测、发放过程中发现的冷凝集素引起的血液凝集，分析可能影响的因素，包括：性别、年龄、血型、献血季节等。从表1可以看出，冷凝集素阳性人群的性别、血型应用c2检验分析，p＞0.05，差异无统计学意义。年龄分析分为2组，18-35岁无偿献血者冷凝集素阳性共2例，36-55岁共10例，经比较有显著性差异（p＜0.05），提示冷凝素阳性率与年龄相关。我们统计发现，无偿献血者冷凝集素阳性人群主要集中在50岁左右，与Paul L.Swiecicki等报道冷凝集素病患者症状出现时的中位年龄为65岁（范围41-83岁）[3]统计结果相近。另外，献血季节与冷凝集素阳性率有显著性差异（p＜0.05），秋冬季冷凝集阳性率显著升高，且主要集中在温度较低的11月至次年2月（共9例，占75%）。宁夏地区冷凝集阳性率为0.02‰（冬季平均温度是-2℃～10℃），低于辽宁本溪血站报道的0.32‰[4]（冬季平均温度是-4℃～6℃），说明随环境温度降低，冷凝集阳性率增加。分析冷凝集阳性率差异大除地区温度的影响外，与我中心工作人员制备、储存过程中对轻度冷凝集血液识别、发现、送检重视不够有关。也有报道发生在高温天气[5]，与我中心统计情况一致（1例6月）。冷凝集冷凝集素综合征可使处于赛冷环境中的患者出现红细胞凝集情况并使受冷部位的血管堵塞，从而表现出鼻、面、口、耳以及指（趾）等部位的皮肤发绀至灰白，且伴有局部冷感、刺痛感以及麻木感[6]。宁夏地处西北内陆地区，冬季较长，环境温度较低，实际工作中发现街头采集血液中由冷凝集素引起红细胞凝集频率较多，通过加强献血者健康征询和体检初筛，避免冷凝集综合征人群献血。

表2结果显示，12例冷凝集素阳性标本在4℃环境中均表现出不同程度的凝集，IgM型抗体效价范围在1：8～1：256之间。在常温环境（24℃）中IgM型抗体效价均有不同程度的降低，有10例标本未凝集。在37℃环境中均未凝集。证实冷凝集素在4℃时抗体活性最强,可与自身红细胞和他人红细胞发生凝集反应,其凝集具有可逆性，当温度升高至常温后活性减弱，温度在37℃时凝集消失。12例标本有5例是检测过程中O细胞凝集送检发现，7例是在血液滤白(2℃～10℃)、储存过程中（2℃～6℃）发现血液出现不同程度肉眼可见的红细胞冷凝集，呈细颗粒状、片状，严重时结成团状。血液在滤白柜进行白细胞过滤，操作时温度为(2 ～ 10)℃，冷凝集血液无法正常通过白细胞滤器，造成血液滤过时间长，凝块容易发现，可采取将滤器部分置37℃温育3～5分钟或血液放置室温过滤，使白细胞过滤顺利进行，如40分钟仍无法完成滤白，则以凝集报废该袋血液。

正常人体内含有少量冷凝集素（效价＜1：32），病理性常见于支原体肺炎、疟疾、肝硬化、淋巴瘤、传染性单核细胞增多症以及对冷凝集素综合征等[7]。我们在实际工作中将冷凝集素效价＜1：32，且在常温和37℃未出现红细胞冷凝集的血液正常发往临床使用（5例），随访未出现输血不良反应。在血液安全管理系统制定了冷凝集素效价≥1：32时进行血液报废和献血者屏蔽机制，避免献血者再次献血而导致血液报废，造成血液的浪费。对于血液采集、制备、检测及血库工作人员，在工作中碰到高效价冷凝集素的血液，认真仔细的观察，及时送检，可有效发现并处理冷凝集血液。

 综上所述，通过重视血液采集、制备、储存过程中对轻度冷凝集血液识别、发现、送检，加强献血者健康征询，建立冷凝集素血液处理流程和献血者屏蔽机制，能为采供血机构冷凝集血液的处理提供参考依据，有效避免血液浪费，保证输血安全。

【参考文献】

[1]  谢惠益，周载鑫，顾海慧，钱宝华.16例冷凝集素造成的血型不合分析.中国输血杂志，2021，34（1）：40-43.

[2]  中华人民共和国卫生部医政司．全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社，2006：193．

[3]  Swiecicki PL，Hegerova LT，Gertz MA．Cold agglutinin disease[J].Blood，2013，122（7）:1114-1121．

[4]  胡海军.探讨献血者冷凝集素阳性血液处理流程[J].中国实用医药，2019，14（36）:187-188．

[5]  杨英姿，刘芳，周志健，等．冷凝集素温度谱广的冷凝集素综合征1例[J].哈尔滨医科大学学报，1999，34（1）:70．

[6]  李丹，曲浩魁，杨世明，等．血液高效价冷凝集素和不规则抗体对输血相容性检测的影响及对策[J].细胞与分子免疫学杂志.2019，35（3）:262-265．

[7]  常红．冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的干扰及处理方法[J].中药处方药，2018，16（12）:152-153．

 [基金项目] 宁夏回族自治区卫生健康系统科研项目：冷凝集素血液处理及献血者屏蔽机制研究（2023-NWKYT-018 ）