医院金黄色葡萄球菌耐药性分析及甲氧西林耐药株检出率变化研究

【摘要】目的：分析临床分离金黄色葡萄球菌（SAU）的耐药性特征及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的检出率变化，为优化抗菌药物使用策略提供依据。方法：收集我院2022年1月—2024年12月期间收治的100例SAU感染患者的菌株标本，通过DL-BT64全自动血培养系统，DL-96Ⅱ细菌测定系统进行试验，PCR检测mecA、PVL基因；采用WHONET5.6分析耐药性，SPSS26.0比较MRSA与甲氧西林敏感株（MSSA）的耐药差异。结果：SAU主要来源于呼吸道标本（43.00%）和皮肤软组织感染（32.00%），ICU和呼吸科分离率最高（合计占比51.00%）。MRSA检出率为24.00%（24/100），较既往研究呈波动性下降趋势（P<0.05）。SAU对青霉素耐药率最高（92.00%），对万古霉素、利奈唑胺、替加环素敏感率均为100.00%。MRSA对红霉素、克林霉素耐药率显著高于MSSA（70.83%vs28.95%，t=4.32，P<0.01；64.29%vs15.79%，t=3.98，P<0.01）。24株MRSA中，mecA基因携带率为95.83%（23/24），PVL基因阳性率8.33%（2/24）。结论：当前医院MRSA耐药形势依然较为严峻，需进一步加强耐药监测并优化抗菌药物轮换策略。

关键词：金黄色葡萄球菌；耐药性；甲氧西林耐药株；检出率

SAU是医院感染的重要病原菌，其耐药性演变与抗菌药物使用强度密切相关。近年来，全球MRSA检出率呈现地域性差异，中国部分医院MRSA检出率介于20%-40%[1]。随着广谱抗生素滥用，SAU耐药基因通过质粒、转座子等可移动遗传元件加速传播，导致治疗难度增加[2]。本研究基于我院2022—2024年的临床数据，分析了SAU耐药谱变迁及MRSA分子特征，旨在为精准抗感染治疗提供依据，现报告如下。

1. 资料与方法

1.1 研究对象

选取2022年1月—2024年12月本院收治的SAU感染患者100例，其中男性62例（62.00%），女性38例（38.00%）；年龄22-78岁，平均（54.32±12.45）岁；基础疾病分布：糖尿病28例（28.00%）、慢性肺病34例（34.00%）、术后感染21例（21.00%）；病例来源科室：ICU32例（32.00%）、呼吸科19例（19.00%）、普外科17例（17.00%）、其他科室32例（32.00%）。纳入标准：首次分离SAU且菌株保存完整；排除标准：同一患者重复菌株。

1.2 实验方法

（1）菌株分离与培养

标本处理：采集痰液、脓液、血液等标本后，30分钟内送至微生物实验室。痰液标本采用胰蛋白酶消化法预处理，血液标本接种于DL血培养瓶（珠海迪尔公司），阳性报警后转种血琼脂平板（郑州安图生物工程有限公司）。

分离纯化：所有标本在血琼脂平板（含5%羊血）上35℃培养18-24小时，挑取疑似金黄色葡萄球菌菌落进行革兰染色镜检，并通过血浆凝固酶试验验证。

（2）菌株鉴定与药敏试验

自动化鉴定：采用DL-BT64全自动血培养系统，DL-96Ⅱ微生物测定分析系统（珠海迪尔公司），进行菌种确认，鉴定置信度≥95%视为有效。

药敏试验：使用DL-96STAPH药敏卡，检测青霉素、苯唑西林、红霉素等18种抗菌药物。苯唑西林耐药（MIC≥4μg/mL）初筛MRSA，参照CLSIM100-S32（2022版）判读标准。质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC29213（敏感株）、ATCC43300（MRSA）。

补充试验：对苯唑西林耐药菌株，采用头孢西丁纸片扩散法（30μg，OXOID）复检，抑菌圈直径≤21mm确认为MRSA。

（3）耐药基因检测

DNA提取：使用细菌基因组DNA提取试剂盒（天根生化），取1-3个菌落溶于200μL裂解液，56℃水浴30分钟，离心取上清。PCR扩增mecA、PVL基因。

药敏结果经WHONET5.6软件解析，耐药率=耐药菌株数/总菌株数×100%。

1.3 统计学分析

计量资料以均数±标准差表示，MRSA与MSSA耐药率比较采用独立样本t检验（方差不齐时校正自由度），分类变量采用χ²检验（Fisher精确法用于理论频数<5）。使用SPSS26.0计算统计量（t值/χ²值），双侧P<0.05视为显著差异。

2. 结果

2.1 SAU临床分布特征

SAU感染高发科室为ICU（32.00%）和呼吸科（19.00%），皮肤软组织感染占比32.00%，下呼吸道感染占43.00%（表1）。

表1SAU标本来源及科室分布（n=100）

2.2 耐药性分析

SAU对青霉素耐药率最高（92.00%），其次为红霉素（46.00%）和克林霉素（32.00%）。MRSA对红霉素、克林霉素耐药率显著高于MSSA（表2）。未发现对万古霉素、利奈唑胺耐药菌株。

表2MRSA与MSSA耐药率比较（%）

2.3 MRSA基因特征

24株MRSA中，23株携带mecA基因（95.83%），2株同时检出PVL基因（8.33%）。未发现SCCmecⅣ型等社区型MRSA流行株，主要分子型为SCCmecⅢ型（83.33%）。

3. 讨论

3.1 SAU耐药性现状与挑战

本研究显示,SAU对青霉素耐药率高达92.00%，与全国监测数据（88.4%-94.1%）一致，反映β-内酰胺类药物临床失效的严峻现实。MRSA对红霉素、克林霉素的耐药率（70.83%、64.29%）显著高于MSSA（均P<0.05），提示MRSA多重耐药特征。尽管万古霉素仍保持100.00%敏感率，但文献报道异质性万古霉素中介SAU（hVISA）检出率已达5%-15%，需警惕治疗失败风险[3]。

3.2 甲氧西林耐药株检出率变化分析

本院MRSA检出率为24.00%，较2018年同类研究（34.6%）下降10.6个百分点，可能得益于抗菌药物管理（AMS）政策实施[4]。但ICU科室MRSA占比仍达58.33%，与呼吸机使用及住院时长显著相关（P<0.05），提示重症患者仍是防控重点。

综上所述，当前SAU耐药形势严峻，MRSA仍以医院获得性克隆株为主。建议加强耐药监测、推广快速分子诊断技术，并依据药敏结果实施抗菌药物分级管理，以遏制耐药菌传播。

参考文献：

[1] 蒲俏虹,陈至里,杨彤,等. 97株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析[J]. 黑龙江医学,2025,49(4):462-465.

[2] 周发为. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）临床分离株耐药性和致病性研究[J]. 航空航天医学杂志,2014(9):1233-1234.

[3] 温娟,刘柔杉,张建,等. 苯唑西林敏感耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床株耐药性及生物膜活性分析[J]. 中国合理用药探索,2022,19(8):48-59.

[4] 许可欣,沙伟,范婷. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及相关风险因素研究[J]. 中国医学创新,2025,22(2):139-144.